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<article-title xml:lang="es"><![CDATA[Aislamiento y serotipificación de Salmonella sp. en estanques con Crocodylus intermedius y testudines cautivos en Villavicencio - Colombia]]></article-title>
<article-title xml:lang="en"><![CDATA[Isolation and serotyping of Salmonella sp. in ponds with captive Crocodylus intermedius and testudines in Villavicencio - Colombia]]></article-title>
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<abstract abstract-type="short" xml:lang="en"><p><![CDATA[Objective. To determine the presence of Salmonella sp., in aquatic environment of Crocodylus intermedius and testudines at the Estación de Biología Tropical Roberto Franco (EBTRF). Materials and methods. Standard methodology was used to isolate Salmonella sp., from water and sediment samples of 52 ponds (n ponds Crocodylus=25; n ponds testudines=27). Salmonella, isolates were serotyped by the Kaufmann-White conventional method and tested for antimicrobial susceptibility by Kirby Bauer technique. Results. The presence of Salmonella sp., was found in 33% of the ponds checked, of which 29% corresponded to serogroup B. Serogrups C, C1, C2 and D1 were detected in a lower percentage. By means of the antimicrobial susceptibility test, 100% of isolates were sensitive to norfloxacin. Conclusions. The predominant presence of Salmonella sp., at EBTFF ponds, corresponded to serogroup B (33%), including species of widely zoonotic characteristics. According to the results, it is necessary to establish biosafety standards at the Estación de Biología Tropical Roberto Franco to avoid zoonotic problems.]]></p></abstract>
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</front><body><![CDATA[   <font face="verdana" size="2">       <p align="right"><b>ORIGINAL</b></p>     <p align="center"><b><font size="4">Aislamiento y serotipificaci&oacute;n de <i>Salmonella</i> sp. en estanques con <i>Crocodylus intermedius</i> y testudines cautivos en Villavicencio - Colombia</font></b></p>      <p align="center"><b><font size="3">Isolation and serotyping of <i>Salmonella</i> sp. in ponds with captive <i>Crocodylus intermedius</i> and testudines in Villavicencio - Colombia</font></b></p>      <p align="center">Diana Pach&oacute;n C,<sup>1</sup> Mic. Agr&iacute;c y Vet, Adriana Pulido V,<sup>1*</sup> M.Sc., Carlos Moreno T,<sup>2</sup> MV.</b></p>      <br>     <p><sup>1</sup>Pontificia Universidad Javeriana. Facultad de Ciencias. Departamento de Microbiolog&iacute;a. Unidad de Investigaciones Agropecuarias - UNIDIA - L&iacute;nea de epidemiolog&iacute;a y salud animal. Bogot&aacute; - Colombia.     <br> <sup>2</sup>Universidad Nacional de Colombia. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Departamento de Ciencias para la Salud Animal. Laboratorio Cl&iacute;nico.  Bogot&aacute; - Colombia.</p>      <p><sup>*</sup>Correspondencia: <a href="mailto:adriana.pulido@javeriana.edu.co">adriana.pulido@javeriana.edu.co</a></p>     <p>Recibido: Febrero de 2010; Aceptado: Enero de 2011.</p> <hr>       ]]></body>
<body><![CDATA[<p><font size="3"><b>Resumen</b></font></p>     <p><b>Objetivo.</b> Determinar la presencia de microorganismos del g&eacute;nero <i>Salmonella</i> sp. en el ambiente acu&aacute;tico de los ejemplares <i>Crocodylus intermedius</i> y testudines en la Estaci&oacute;n de Biolog&iacute;a Tropical Roberto Franco (EBTRF). <b>Materiales y m&eacute;todos.</b> En este estudio se utiliz&oacute; la metodolog&iacute;a est&aacute;ndar para aislar e identificar microorganismos del g&eacute;nero <i>Salmonella</i> sp., a partir de muestras de agua y sedimento de 52 estanques (n<sub>Estanques Crocodylus</sub>=25; n<sub>Estanques testudines</sub>=27); se procedi&oacute; a serotipificar los aislamientos por el m&eacute;todo convencional de Kaufmann-White y se realizaron pruebas de sensibilidad a antimicrobianos por la t&eacute;cnica de Kirby Bauer.<b> Resultados.</b> Se determin&oacute; la presencia de <i>Salmonella</i> sp., en un 33% del total de estanques muestreados. El 29% de los aislamientos de <i>Salmonella</i> sp. serotipificados, correspondi&oacute; al serogrupo B; los serogrupos C, C1, C2 y D1 presentaron menores porcentajes. Con las pruebas de sensibilidad a antimicrobianos se determin&oacute; que el 100% de los aislamientos fueron sensibles a norfloxacina. <b>Conclusiones.</b> La ocurrencia de <i>Salmonella</i> sp., en los estanques de la EBTRF fue del 33%, con la mayor presencia del serogrupo B, donde se encuentran especies con caracter&iacute;sticas ampliamente zoon&oacute;ticas. Con los resultados obtenidos es necesario el seguimiento de las normas de bioseguridad establecidas en la estaci&oacute;n para el manejo de las poblaciones all&iacute; mantenidas y evitar de esa manera la ocurrencia de cuadros zoon&oacute;ticos.    <br> </p>      <p><b>Palabras clave:</b> <i>Crocodylus intermedius</i>, testudines, <i>Salmonella</i> sp., serotipificaci&oacute;n, zoonosis. <i>(Fuente: AIMS).</i></p>   <hr>      <p><font size="3"><b>Abstract</b></font></p>     <p><b>Objective.</b> To determine the presence of <i>Salmonella</i> sp., in aquatic environment of <i>Crocodylus intermedius</i> and testudines at the Estaci&oacute;n de Biolog&iacute;a Tropical Roberto Franco (EBTRF). <b>Materials and methods.</b> Standard methodology was used to isolate <i>Salmonella</i> sp., from water and sediment samples of 52 ponds (n<sub>ponds Crocodylus</sub>=25; n<sub>ponds testudines</sub>=27). <i>Salmonella</i>, isolates were serotyped by the Kaufmann-White conventional method and tested for antimicrobial susceptibility by Kirby Bauer technique. <b>Results. </b>The presence of <i>Salmonella</i> sp., was found in 33% of the ponds checked, of which 29% corresponded to serogroup B. Serogrups C, C1, C2 and D1 were detected in a lower percentage. By means of the antimicrobial susceptibility test, 100% of isolates were sensitive to norfloxacin. <b>Conclusions.</b> The predominant presence of <i>Salmonella</i> sp., at EBTFF ponds, corresponded to serogroup B (33%), including species of widely zoonotic characteristics. According to the results, it is necessary to establish  biosafety standards at the Estaci&oacute;n de Biolog&iacute;a Tropical Roberto Franco to avoid zoonotic problems.</p>      <p><b>Key words:</b> <i>Crocodylus intermedius</i>, testudines, <i>Salmonella</i> sp., serotyping, zoonoses.<i> (Source: AIMS).</i></p>   <hr>      <p><font size="3"><b>Introducci&oacute;n</b></font></p>      <p>La Estaci&oacute;n de Biolog&iacute;a Tropical Roberto Franco (EBTRF), ubicada en la ciudad de Villavicencio - Meta, es un centro de recuperaci&oacute;n de fauna silvestre, especialmente reptiles en amenaza y/o v&iacute;a de extinci&oacute;n, que con el manejo de dichas poblaciones logra minimizar el riego de extinci&oacute;n de las especies (<a href="#Tab1">Tabla 1</a>)(1); su labor se encamina al cuidado y recuperaci&oacute;n de ejemplares de <i>Crocodylus intermedius</i> y Testudines, all&iacute; se llevan a cabo investigaciones en el &aacute;mbito reproductivo que permiten la repoblaci&oacute;n de estos ejemplares. </p> <a name="Tab1"></a>     <p align="center"><img src="img/revistas/mvz/v16n2/v16n2a15t1.jpg"></p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p>La <i>Salmonella</i> sp., es un microorganismo perteneciente a la familia Enterobacteriacea, un reconocido pat&oacute;geno de mam&iacute;feros, pero que hace parte de la flora comensal del tracto gastrointestinal de los reptiles, por lo que &eacute;stos son considerados como portadores asintom&aacute;ticos; sin embargo, puede comportarse como oportunista y colonizarlos tambi&eacute;n sist&eacute;micamente teniendo como v&iacute;a de entrada el agua, el suelo, el alimento contaminado y/o mediante transmisi&oacute;n vertical (2). </p>     <p>La susceptibilidad de los reptiles a patolog&iacute;as causadas por enterobacterias especialmente del g&eacute;nero <i>Salmonella</i> sp, se relacionan con estados de inmunodepresi&oacute;n en el animal, lo que se puede producir a causa del estr&eacute;s por cautiverio, a la alteraci&oacute;n en temperaturas medioambientales, al n&uacute;mero de microorganismos presentes, la edad y el estado nutricional del animal entre otras (2-5). Cuando estas afecciones se presentan el resultado es la alteraci&oacute;n de tejidos y fluidos por la generaci&oacute;n de coagulaci&oacute;n intravascular diseminada, edema, ulceraciones, necrosis, anemia, disminuci&oacute;n de la actividad, p&eacute;rdida de peso progresiva, anorexia, polifagia, regurgitaci&oacute;n, diarrea, constipaci&oacute;n y letargia (3).  </p>     <p>Aunque son escasos los reportes acerca de la presencia de <i>Salmonella</i> sp. en estas especies silvestres y espec&iacute;ficamente en Crocodylus intemedius, se ha establecido que su presencia es constante, por lo que se deben conocer las serovariedades implicadas y la posible susceptibilidad que tienen tanto de los animales cautivos como de los salvajes, puesto que parece ser que en los centros donde los reptiles est&aacute;n en condiciones de cautiverio, hay mayor posibilidad de aislamiento de esta bacteria que en estado libre (6,7). Con base en lo anterior, es necesario tener en cuenta que el conocimiento de la presencia de pat&oacute;genos tanto en el h&aacute;bitat como en la poblaci&oacute;n microbiana cloacal de estas especies, es fundamental para diagnosticar des&oacute;rdenes en la flora digestiva, as&iacute; como para prevenir infecciones secundarias que puedan poner en peligro la sobrevivencia de los ejemplares (8), todo ello dirigido a optimizar los respectivos programas de conservaci&oacute;n. </p>      <p>Reconociendo la transmisi&oacute;n de <i>Salmonella</i> sp., por agua y teniendo en cuenta la importancia cl&iacute;nica especialmente en animales inmunosuprimidos, se llev&oacute; a cabo el aislamiento e identificaci&oacute;n de enterobacterias del g&eacute;nero referido, a partir de muestras del agua y del sedimento de los estanques donde se encuentran los ejemplares, adem&aacute;s se establecieron los serogrupos que predominan en dichas especies.  </p>     <p>A pesar de no ser uno de los objetivos planteados, durante la realizaci&oacute;n de este estudio se realiz&oacute; una observaci&oacute;n sobre la condici&oacute;n general de los ejemplares de <i>Crocodylus intermedius</i> y Testudines cautivos en la EBTRF, debido a que de acuerdo con las listas oficiales de especies amenazadas publicadas por la Uni&oacute;n Internacional para la Conservaci&oacute;n de la Naturaleza (UICN), son los reptiles las especies de vertebrados m&aacute;s amenazadas en Colombia (1,9); vale la pena aclarar que no s&eacute; realiz&oacute; examen cl&iacute;nico a fin de evitar un &quot;estr&eacute;s&quot; adicional por la manipulaci&oacute;n de los ejemplares.  </p>     <p>El objetivo del presente estudio fue determinar la presencia de microorganismos del g&eacute;nero <i>Salmonella</i> sp., en el ambiente acu&aacute;tico de los ejemplares <i>Crocodylus intermedius</i> y Testudines en la Estaci&oacute;n de Biolog&iacute;a Tropical Roberto Franco (EBTRF). </p>      <p><font size="3"><b>Materiales y m&eacute;todos</b></font></p>      <p><b>An&aacute;lisis de datos.</b> Los datos obtenidos fueron analizados mediante estad&iacute;stica descriptiva y su interpretaci&oacute;n se facilit&oacute; con la elaboraci&oacute;n de tablas, histogramas y gr&aacute;ficos circulares, entre otros. </p>     <p><b>Sitio de estudio.</b> Esta investigaci&oacute;n se llev&oacute; a cabo en la EBTRF ubicada en la ciudad de Villavicencio  Meta, centro de investigaci&oacute;n de la Facultad de Ciencias de la Universidad Nacional de Colombia Sede Bogot&aacute;. </p>     <p>Las condiciones clim&aacute;ticas muestran un r&eacute;gimen de lluvias unimodal con una precipitaci&oacute;n media anual de 4085 mm; temperatura promedio de 27&deg;C y una humedad relativa de 77.8% (9). </p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p>La EBTRF, cuenta actualmente con una colecci&oacute;n viva que supera los 300 ejemplares de tortugas terrestres nativas del pa&iacute;s, distribuidas en m&aacute;s de 20 especies (<a href="#Tab1">Tabla 1</a>) y adicionalmente un n&uacute;mero mayor a 200 ejemplares de <i>Crocodylus intermedius</i> distribuidos en diferentes grupos et&aacute;reos entre los que se encuentra una gran cantidad (80%) de neonatos y juveniles, producto de investigaciones en el &aacute;rea reproductiva.  </p>     <p><b>Poblaci&oacute;n muestreal.</b> El muestreo se realiz&oacute; sobre la totalidad de estanques (N=52) de la Estaci&oacute;n. El total de animales muestreados en forma indirecta fue de 29 caimanes adultos (4 a&ntilde;os en adelante) distribuidos en 8 estanques, 118 ejemplares juveniles (3-4 a&ntilde;os) ubicados en 8 estanques y 80 caimanes neonatos (1-2 a&ntilde;os) distribuidos en 9 estanques (n<sub>EstanquesCrocodylus</sub>=25). Se muestrearon un total de 342 individuos del Orden Testudinea distribuidos en 19 especies (<a href="#Tab1">Tabla 1)</a> de las cuales 14 se encuentran en diferentes grados de riesgo de extinci&oacute;n (1); cabe resaltar que dichos ejemplares se encontraban ubicados en 27 estanques (n<sub>Estanques testudines</sub>=27). </p>     <p>A pesar de haberse realizado un muestreo indirecto con el fin de evitar el estr&eacute;s por captura, fue evidente que todos los ejemplares se encontraban cl&iacute;nicamente sanos. En la EBTRF, no se han presentado brotes epidemiol&oacute;gicos de salmonelosis en los ejemplares. </p>     <p><b>Muestreo.</b> Se realizaron tres muestreos seriados con un rango de diferencia de 15 d&iacute;as cada uno, dada la caracter&iacute;stica de excreci&oacute;n intermitente de la bacteria por parte del animal (10-13). En caso de reportarse la presencia de <i>Salmonella</i> sp., el estanque positivo fue excluido para el siguiente muestreo y los estanques negativos se muestrearon nuevamente de acuerdo con lo programado.  Durante este periodo se suspendi&oacute; el recambio de agua de los estanques. </p>     <p>Recolecci&oacute;n de muestra de agua y sedimento de los estanques.  </p>     <p><b><i>Crocodylus intermedius</i> neonatos y testudines.</b> Una vez se homogeniz&oacute; por agitaci&oacute;n el agua de los estanques, se introdujo una jeringa est&eacute;ril de 50 ml a la cual previamente se le hab&iacute;a conectado una sonda est&eacute;ril de 50 cm de longitud y se realiz&oacute; aspirado del fondo del estanque obteniendo una muestra total de 250 ml de agua y sedimento, esta se deposit&oacute; en bolsas de cierre herm&eacute;tico. Se emple&oacute; una jeringa y una sonda por cada estanque. </p>     <p><b><i>Crocodylus intermedius</i> adultos y juveniles.</b> La toma de muestras se realiz&oacute; a partir de los canales de desag&uuml;e, se abrieron los sistemas de evacuaci&oacute;n y se tomaron aproximadamente 250 ml de agua y sedimento directamente en la bolsa de cierre herm&eacute;tico. </p>     <p>Todas las muestras se remitieron debidamente identificadas y fueron transportadas en refrigeraci&oacute;n (4&deg;C) por un periodo menor de 6 horas (14-16) para inmediatamente ser procesadas en el laboratorio de microbiolog&iacute;a veterinaria de la Universidad Nacional de Colombia Sede Bogot&aacute;.  </p>     <p><b>Aislamiento e identificaci&oacute;n de <i>Salmonella</i> sp.</b> El cultivo de la bacteria fue realizado de acuerdo con la norma ISO 6579:2002/Amd 1:2007, con adici&oacute;n de algunos medios de cultivo que han demostrado dar buenos resultados en la recuperaci&oacute;n del microorganismo (17-19).  Las muestras fueron procesadas para evaluar la presencia de <i>Salmonella</i> sp., siguiendo cuatro pasos en el  procedimiento: </p>     <p><b>Pre-enriquecimiento no selectivo.</b> A cada muestra se le adicionaron 250 ml de caldo lactosado est&eacute;ril e inmediatamente se llev&oacute; a incubaci&oacute;n a una temperatura de 37&deg;C,  durante un periodo de 18-24 horas (14, 17). </p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p><b>Enriquecimiento selectivo.</b> A partir del caldo de pre-enriquecimiento no selectivo, se obtuvo con una jeringa est&eacute;ril 10 ml de la suspensi&oacute;n y se llev&oacute; a un tubo de ensayo con 10 ml de caldo tetrationato que se incub&oacute; en ba&ntilde;o serol&oacute;gico a 43&plusmn;0.5&deg;C por 24 h (14). </p>     <p><b>Aislamiento en medios selectivos y diferenciales.</b> Se evaluaron dos medios de cultivo selectivos con diferentes fundamentos de identificaci&oacute;n: Agar MacConkey (Mck)<sup>BD&reg;</sup>  y CHROMagar Orientaci&oacute;n<sup>BD&reg;</sup>, la siembra se realiz&oacute; mediante t&eacute;cnica de aislamiento o agotamiento  de colonias;  las cajas se incubaron a una temperatura de 37&deg;C durante 24 h. Transcurrido este tiempo, las colonias compatibles con el g&eacute;nero <i>Salmonella</i> sp. se detectaron en agar MacConkey<sup>BD&reg;</sup> por su caracter&iacute;stica macrosc&oacute;pica de ser lactosa negativo y en CHROMagar Oientaci&oacute;n<sup>BD&reg;</sup> por ser incoloras debido a que no se presenta reacci&oacute;n con los sustratos crom&oacute;genos del medio; adicionalmente, en los medios empleados las colonias presentaban borde definido, tama&ntilde;o aproximado de 1 a 1.5 mm de di&aacute;metro y ligeramente convexas (18,19). </p>     <p><b>Identificaci&oacute;n preliminar.</b> Las colonias compatibles de <i>Salmonella</i> sp. fueron aisladas en medios diferenciales como Agar Hektoen Ent&eacute;rico (H.E) (17,18) y CHROMagar <i>Salmonella</i><sup>BD&reg;</sup>. Macrosc&oacute;picamente en H.E las colonias se clasificaban como sospechosas de <i>Salmonella</i> sp.  por su caracter&iacute;stica lactosa negativo evidenci&aacute;ndose en ella una coloraci&oacute;n verde - azulada con precipitado negro en el centro debido a la producci&oacute;n de sulfuro de hidr&oacute;geno, lo que le da la apariencia de colonia en &quot;ojo de pescado&quot;. En CHROMagar <i>Salmonella</i><sup>BD&reg;</sup> debido a diferencias metab&oacute;licas en la presencia de crom&oacute;genos del medio, las colonias de <i>Salmonella</i> sp. se observan de color rosa - p&uacute;rpura, mientras que los microorganismos pertenecientes a otros g&eacute;neros  se observan con pigmento verde - azulado o son completamente inhibidos (<a href="#Fig1">Figura 1</a>) (18). </p> <a name="Fig1"></a>     <p align="center"><img src="img/revistas/mvz/v16n2/v16n2a15f1.jpg" width="580" height="285" alt="Figura 1"></p>     <p><b>Identificaci&oacute;n bioqu&iacute;mica.</b> El reconocimiento definitivo de los microorganismos pertenecientes al g&eacute;nero <i>Salmonella</i> sp. se realiz&oacute; mediante el sistema de identificaci&oacute;n BD BBL Crystal<sup>BD&reg;</sup> para bacterias ent&eacute;ricas/no fermentadoras siguiendo las indicaciones del productor (20,21). </p>     <p><b>Serotipificaci&oacute;n.</b> Los aislamientos de <i>Salmonella</i> sp. fueron serotipificados hasta ant&iacute;geno som&aacute;tico con antisueros polivalentes espec&iacute;ficos (B y C) y antisueros monovalentes de grupo (B, C1, C2 y D1), se identificaron de acuerdo al esquema de Kauffman - White (2, 22). </p>     <p><b>Susceptibilidad a antibi&oacute;ticos.</b> La prueba de sensibilidad a antimicrobianos se realiz&oacute; mediante el m&eacute;todo de Kirby - Bauer. Los antibi&oacute;ticos evaluados fueron Sulfatrimetoprim 25 &micro;g, Norfloxacina 10 &micro;g, Ampicilina 10 &micro;g, Cloranfenicol 20 &micro;g, Cefoxitin 20 &micro;g,  y Tetraciclina 30 &micro;g (10, 18). </p>         <p><font size="3"><b>Resultados</b></font></p>      <p><b>Positividad a <i>Salmonella</i> sp.</b> en Estanques de Crocodylus y Testudines. Los N=52 estanques de la EBTFF, se encuentran distribuidos entre las especies de Crocodylus de diferentes grupos et&aacute;reos (n<sub>Estanques Crocodylus</sub>  =25, as&iacute;: 1 con Caiman Crocodylus (Babillas) y 24 con <i>Crocodylus intermedius</i>) y 27 estanques de Testudines (n<sub>Estanques Testudines</sub>=27). </p>     <p>En la <a href="#Fig2">figura 2</a> se encuentran consignados los resultados obtenidos en la totalidad de estanques, donde se estableci&oacute; que en 17 (33%) de los 52 estanques muestreados fue posible recuperar microorganismos pertenecientes al g&eacute;nero <i>Salmonella</i> sp. mientras los 35 (67%) restantes se encontraban negativos para la bacteria. </p> <a name="Fig2"></a>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p align="center"><img src="img/revistas/mvz/v16n2/v16n2a15f2.jpg"></p>     <p>En 9 de los 24 estanques con <i>Crocodylus intermedius</i> se hallo <i>Salmonella</i> sp., y el estanque ocupado con ejemplares de Caiman crocodylus (Babillas) fue igualmente positivo a la bacteria, lo que representa el 40% (n=10) de positividad. Por otro lado, de los 27 estanques de tortugas, 7 (25.9%)  fueron positivos para <i>Salmonella</i> sp., encontr&aacute;ndose la presencia del microorganismo en 7 de las 18 especies  que conforman la colecci&oacute;n viva de la EBTRF. (<a href="#Fig3">Figura 3</a>) </p> <a name="Fig3"></a>     <p align="center"><img src="img/revistas/mvz/v16n2/v16n2a15f3.jpg"></p>     <p>Es necesario aclarar que en el primer muestreo se remitieron al laboratorio 52 muestras de agua y sedimento, en el segundo muestreo  37  y en el tercero 36 muestras; esto debido a que si en alguno de los estanques evaluados se reportaba la presencia de <i>Salmonella</i> sp., no era relevante muestrear nuevamente dicho estanque ya que el estudio estaba condicionado a la evaluaci&oacute;n de la presencia/ausencia de la bacteria </p>     <p><b>Serotipificaci&oacute;n.</b> Los 17 aislamientos identificados por el m&eacute;todo de Crystal<sup>BD&reg;</sup> como <i>Salmonella</i> sp. se lograron clasificar con antisueros comerciales DIFCO<sup>&reg;</sup>, hallando 6 serogrupos prevalentes en la Estaci&oacute;n. En la <a href="#Fig4">figura 4</a> se observa que de los aislamientos de <i>Salmonella</i> sp., hallados en las muestras de agua y sedimento, el 29% pertenecen al serogrupo B; mientras que la presencia de las bacterias clasificadas como pertenecientes al serogrupo C1 y serogrupo C2 fue de 23 y 24%, respectivamente. El porcentaje restante de los aislamientos pertenecen a serovariedades incluidas en los serogrupos que abarca el antisuero polivalente B (12%), serogrupo D1 (6%) y serogrupos pertenecientes al polivalente C (6%) </p> <a name="Fig4"></a>     <p align="center"><img src="img/revistas/mvz/v16n2/v16n2a15f4.jpg"></p>     <p><b>Pruebas de sensibilidad a antimicrobianos.</b> Los resultados obtenidos en las pruebas de sensibilidad a partir de los aislamientos de <i>Salmonella</i> sp. provenientes de <i>Crocodylus</i> y testudines, se encuentran consignados en la <a href="#Tab2">tabla 2</a> y en la <a href="#Fig5">figura 5</a>, donde se puede observar el comportamiento  de  la bacteria ante diferentes antibi&oacute;ticos. </p> <a name="Tab2"></a>     <p align="center"><img src="img/revistas/mvz/v16n2/v16n2a15t2.jpg"></p>  <a name="Fig5"></a>     <p align="center"><img src="img/revistas/mvz/v16n2/v16n2a15f5.jpg"></p>      <p>Se puede establecer que existen diferencias notables para cada una de las especies, puesto que las <i>Salmonella</i> sp., obtenidas de muestras provenientes de caim&aacute;n son mucho m&aacute;s sensibles a los antimicrobianos que las de testudines, donde varios de los aislamientos fueron resistentes a los antibi&oacute;ticos utilizados; por ejemplo, para cloranfenicol todas las cepas provenientes de caim&aacute;n fueron sensibles mientras que en testudines 4 evidenciaron resistencia al antibi&oacute;tico.  </p>       ]]></body>
<body><![CDATA[<p><font size="3"><b>Discusi&oacute;n</b></font></p>      <p>Es de vital importancia tener en cuenta, que es muy poco lo que se ha investigado a nivel mundial acerca de la presencia de la <i>Salmonella</i> sp. en especies como <i>Crocodylus intermedius</i>, que se encuentran en peligro cr&iacute;tico de extinci&oacute;n (1) y que otros reptiles son el principal objetivo de los centros de conservaci&oacute;n y mantenimiento de las especies mediante programas de reproducci&oacute;n. Por muchos a&ntilde;os se han encaminado estudios hacia especies que son criadas como mascotas no convencionales o ex&oacute;ticas, tales como iguanas, lagartos, tortugas y serpientes (8, 23-28), pero no en animales con alg&uacute;n grado de amenaza o en v&iacute;a de extinci&oacute;n; adicionalmente las investigaciones acerca de la presencia de <i>Salmonella</i> sp. en los animales y en su h&aacute;bitat natural son insuficientes.  </p>     <p>Si bien es cierto que <i>Salmonella</i> sp. hace parte de la flora normal intestinal de los reptiles y que su aislamiento en testudines de diferentes familias ha sido reportado con mayor frecuencia (8,23,25,26-29) que en<i> Crocodylus</i>; no se puede ignorar que para todos los individuos evaluados tanto tortugas como caimanes, las condiciones de cautiverio donde son mantenidos crean cuadros de inmunosupresi&oacute;n marcada donde la enterobacteria es excretada de manera intermitente (10-13, 30, 31) y que puede llegar a colonizar el tracto digestivo hasta producir cuadros patol&oacute;gicos con estados de letargia, anorexia, septicemia, neumon&iacute;a, celomitis, abscesos, shock hipovol&eacute;mico y bajo circunstancias extremas, la muerte del ejemplar (32-34).  </p>     <p>Aunque todos los reptiles son considerados portadores naturales de <i>Salmonella</i> sp., lagartos, serpientes y tortugas en particular, son reservorios de esta bacteria (23,24,35); sin embargo, no es claro como estas especies son colonizadas de forma natural por serovariedades de <i>Salmonella</i> sp. Respecto de la transmisi&oacute;n, en algunos estudios se ha evaluado la capacidad de colonizaci&oacute;n de la bacteria en &uacute;tero, contaminaci&oacute;n perinatal, por ingesti&oacute;n de presas contaminadas y/o contacto con heces de otros reptiles (32, 36); seg&uacute;n Kourany y Telford (33), la predisposici&oacute;n a condiciones de estr&eacute;s y escases de alimento hacen que la bacteria atraviese la barrera sangu&iacute;nea y linf&aacute;tica llegando a oviducto, causando as&iacute; la contaminaci&oacute;n de los huevos; sin embargo, Mitchell y Shane (26), sugieren que la contaminaci&oacute;n de los huevos se da por abrasi&oacute;n del mismo cuando entra en contacto con el suelo y c&aacute;scaras remanentes, descartando as&iacute; la transmisi&oacute;n vertical puesto que no lograron el aislamiento del microorganismo a partir de ovarios, oviducto y saco embrionario.  </p>     <p>Respecto de la transmisi&oacute;n horizontal, la mayor&iacute;a de investigaciones concluyen que la ingesta de agua contaminada con heces es la principal v&iacute;a de infecci&oacute;n por el ambiente, consider&aacute;ndose el medio acu&aacute;tico favorable para ello (31) sin llegar a subestimar que el alimento y el contacto con otros  reptiles tambi&eacute;n son una importante v&iacute;a de transmisi&oacute;n. Las altas tasas de ejemplares portadores de <i>Salmonella</i> sp., se relacionan con el comportamiento de coprofagia por parte de las cr&iacute;as, lo que a su vez asegura la transmisi&oacute;n prematura de dichos microorganismos (3). </p>     <p>De acuerdo con algunos estudios, las muestras  de  origen  ambiental permiten un mayor porcentaje de recuperaci&oacute;n del microorganismo dado que la bacteria no es excretada de manera continua; realizar  &uacute;nicamente muestreos de hisopado cloacal no asegura la obtenci&oacute;n de resultados positivos puesto que no es posible determinar si el ejemplar en estudio est&aacute; excretando la bacteria en el momento de la recolecci&oacute;n de la muestra (9, 36). <i>Salmonella</i> sp. es altamente resistente fuera de su hospedero y permanece viable despu&eacute;s de 89 d&iacute;as en el suelo y/o agua y 30 meses en materia fecal, lo que permite inferir que todo el ambiente del encierro es fuente para aislamientos positivos para la enterobacteria en menci&oacute;n (30). </p>     <p>La resistencia a antimicrobianos por parte de los aislamientos de <i>Salmonella</i> sp. a partir de muestras de origen animal es un problema emergente; estas bacterias pueden ser una fuente de pl&aacute;smidos de resistencia para otras bacterias y producir alteraciones en el tratamiento antimicrobiano clave para combatir enfermedades en medicina humana y veterinaria (37,38). Simult&aacute;neamente se puede asegurar que el antibi&oacute;tico de elecci&oacute;n para tratar casos sintom&aacute;ticos en la EBTRF es norfloxacina debido a que todos los aislamientos de <i>Salmonella</i> sp. enfrentados a este antimicrobiano tienen un alto grado de sensibilidad (<a href="#Fig5">Figura 5</a>); de igual manera se establece que tetraciclina tiene un comportamiento de sensibilidad intermedia para todos y que cloranfenicol es un antimicrobiano que tendr&iacute;a alto rendimiento contra los microorganismos de este g&eacute;nero obtenidos a partir de ejemplares de caim&aacute;n; sin embargo, dicho antibi&oacute;tico tiene restricciones al ser suministrado por generar alteraciones y degeneraciones a nivel de m&eacute;dula &oacute;sea (9). </p>      <p>No se puede olvidar que el uso de antibi&oacute;ticos de amplio espectro como las quinolonas (norfloxacina) que mostraron un 100% de efectividad frente a los aislamientos de la estaci&oacute;n (<a href="#Fig5">Figura 5</a>), son ampliamente utilizados en medicina herpetol&oacute;gica y pueden ser causa de alteraci&oacute;n momentanea grave de la flora Gram negativa y Gram positiva que se encuentra en el tracto gastrointestinal de estas especies; existen datos bibliogr&aacute;ficos que demuestran una cierta tendencia a la anorexia o a alteraciones digestivas en reptiles herb&iacute;voros tras terapias prolongadas de antibi&oacute;ticos (39).  </p>     <p>A la importancia m&eacute;dica de las infecciones por <i>Salmonella</i> sp. en centros de conservaci&oacute;n/zoocr&iacute;a y en el h&aacute;bitat natural, se le suma el potencial zoon&oacute;tico, ya que los aislamientos de la bacteria a partir de reptiles se han considerado como pat&oacute;genos para humanos, al poseer factores de patogenicidad cruciales en el desarrollo de una gastroenteritis (20). </p>     <p>Los serogrupos de <i>Salmonella</i> sp. hallados en agua y sedimento de los estanques de la EBTRF han sido frecuentemente reportados en reptiles; teniendo en cuenta que el grupo B fue el serogrupo de mayor ocurrencia (29%) y el serogrupo D1 fue hallado en un 6%, es posible inferir en la hip&oacute;tesis de encontrar serovariedades con alto potencial zoon&oacute;tico, puesto que en estos serogrupos se encuentran incluidas especies como <i>Salmonella</i> <i>typhimurium</i> (Grupo B) y S. <i>enterididis</i> (Grupo D), dos de los serovares comunmente implicados en aproximadamente el 50% de los casos de salmonelosis en personas de los Estados Unidos (33) , lo que permite plantear que el personal que labora en la Estaci&oacute;n se encuentra en riesgo de contraer el pat&oacute;geno.  </p>     ]]></body>
<body><![CDATA[<p>Adicionalmente, seg&uacute;n Popoff y Le Minor (12) y Grimont y Weill (13), en el serogrupo C2 se encuentran incluidas serovariedades como <i>S. newport</i> y <i>S. muenchen</i> que son agentes causales de salmonelosis en humanos, reptiles y caprinos, entre otras especies (12, 13, 26, 28). Por otra parte, los antisueros polivalentes B y C, incluyen serovariedades de <i>Salmonella</i> que han sido aisladas constantemente a partir de muestras de reptiles, all&iacute; se encuentran <i>S. oranienburg, S. berta, S. panama, S. rubislaw</i>, entre otras; muchas de las cuales se han reportado como agentes etiol&oacute;gicos de patolog&iacute;as gastrointestinales en los reptiles y algunas veces asociadas a salmonelosis en humanos, producidas por contacto directo con el animal asintom&aacute;tico (5, 17, 18, 24). </p>     <p>Cabe resaltar, que a&uacute;n sin la serotipificaci&oacute;n completa de los aislamientos de <i>Salmonella</i> sp. obtenidos en la EBTRF, es pertinente considerar que el personal que labora all&iacute; se encuentra en inminente riesgo de contraer salmonelosis, por lo tanto, como m&eacute;todo de prevenci&oacute;n es necesario el seguimiento de las normas de bioseguridad establecidas para el manejo de las poblaciones all&iacute; mantenidas. </p>     <p>Este documento es el primer reporte sobre microbiolog&iacute;a del ambiente en ejemplares de <i>Crocodylus intermedius</i> en Colombia, siendo de importancia para la medicina de reptiles y aportando al conocimiento del riesgo zoon&oacute;tico en el personal a cargo de este tipo de ejemplares.  </p>     <p>En conclusi&oacute;n, se logr&oacute; aislar e identificar mediante an&aacute;lisis microbiol&oacute;gicos la presencia de enterobacterias del g&eacute;nero <i>Salmonella</i> sp., en muestras de agua-sedimento de estanques con ejemplares de Testudines y Crocodylus mantenidos en cautiverio en la Estaci&oacute;n de Biolog&iacute;a Tropical Roberto en la Ciudad de Villavicencio; estableciendo su ocurrencia en el 33% de los estanques. </p>     <p>Los ejemplares de la EBTRF son portadores asintom&aacute;ticos de <i>Salmonella</i> sp.; sin embargo, se deben implementar buenas pr&aacute;cticas de manejo en los animales de manera que se minimice el potencial  pat&oacute;geno oportunista del microorganismo y se evite el desencadenamiento de cuadros cl&iacute;nicos asociados con salmonelosis en los reptiles.  </p>     <p>La norfloxacina es el antibi&oacute;tico ideal para tratar los ejemplares de la Estaci&oacute;n Roberto Franco que puedan presentar sintomatolog&iacute;a asociada a salmonelosis, aunque su administraci&oacute;n debe ser cuidadosa con el fin de evitar alteraciones en la flora digestiva natural de los reptiles. </p>     <p>La presencia de <i>Salmonella</i> sp. en el ambiente, hace necesario el seguimiento de las normas de bioseguridad establecidas en la Estaci&oacute;n para el manejo de las poblaciones all&iacute; mantenidas y evitar de esa manera la presentaci&oacute;n de cuadros zoon&oacute;ticos. </p>      <p><b>Agradecimientos</b></p>  Al Laboratorio de Microbiolog&iacute;a de la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia de la Universidad Nacional de Colombia. A Becton Dickinson Colombia Ltda. por la dotaci&oacute;n de medios de cultivo, kit de identificaci&oacute;n y sensidiscos. Al equipo humano de la Estaci&oacute;n de Biolog&iacute;a Tropical Roberto Franco por toda su colaboraci&oacute;n y especialmente a su directora profesora Mar&iacute;a Cristina Ardila por sus aportes al trabajo. <hr>     <p><font size="3"><b>Referencias</b></font></p>      <!-- ref --><p>1. Casta&ntilde;o O V. Libro rojo de reptiles de Colombia. Serie Libros Rojos de Especies Amenazadas de Colombia. Instituto Nacional de Ciencias Naturales - Universidad Nacional de Colombia y Ministerio del Medio Ambiente. 2002. Bogot&aacute;, Colombia. En: <a href="http://www.humboldt.org.co/conservacion/reptiles_amenazados.htm"   target="_blank">http://www.humboldt.org.co/conservacion/reptiles_amenazados.htm</a>.&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000082&pid=S0122-0268201100020001500001&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>2. Popoff M and Le Minor L. Antigenic Formulas of the <i>Salmonella</i> Serovars. 7th revisi&oacute;n. WHO Collaborating center for reference and research on <i>Salmonella</i>. Paris, France: Institut Pasteur; 1997. &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000083&pid=S0122-0268201100020001500002&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>3. Mader D. Reptile Medicine and Surgery. W.B. Phyladelphia, USA: Saunders Company; 1996.  &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000084&pid=S0122-0268201100020001500003&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>4. Chiodini RJ and Sundberg JP. Salmonellosis in reptiles: a review. Am J Epidemiol 1981; 113:494-499. &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000085&pid=S0122-0268201100020001500004&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>5. Onderka DK and Finlayson MC. <i>Salmonella</i>e and salmonellosis in captive reptiles. Can J Comp Med 1985; 49:268-270.  &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000086&pid=S0122-0268201100020001500005&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>6. Jertborn M, Hagling P, Iwarson S and Svennerholm M. Estimation of symptomatic and asymptomatic <i>Salmonella</i> infections. Scand J Infect Dis 1990; 22:451-455. &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000087&pid=S0122-0268201100020001500006&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>7. Burnham BR, Atchley DH, DeFusco RP, Ferris KE, Zicarelli JC, Lee JH and Angulo FJ. Prevalence of fecal shedding of <i>Salmonella</i> organisms among captive green iguanas and potencial public health implications. J Am Vet Med Assoc 213, 48-50. 1998. &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000088&pid=S0122-0268201100020001500007&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>8. Ramsay EC, Daniel G, Tryon BW, Merryman JI, Morris PJ and Bemis DA. Osteomyelitis Associated whit <i>Salmonella</i> enterica ss arizonae in a colony of ridgenose rattlesnakes (<i>Crotalus Willardi</i>). J Zoo Wildl Med 2002; 33(4):301-310. &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000089&pid=S0122-0268201100020001500008&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>9. Saelinger C and Lewbart G. Prevalence of <i>Salmonella</i> spp in cloacal, fecal, and gastrointestinal mucosal samples from wild North American turtles. JAVMA 2006; 229:266-273.  &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000090&pid=S0122-0268201100020001500009&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>10. Ebani VV, Cerri D, Fratini F, Meille N, Valentini P and Andreani E. <i>Salmonella</i> <i>ent&eacute;rica</i> isolates from faeces of domestic reptiles and a study of their antimicrobial <i>in vitro</i> sensitivity. Vet Sci 2005; 78:117-121.  &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000091&pid=S0122-0268201100020001500010&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>11. Minette HP. Epidemiologic Aspects of salmonelosis in reptiles, amphibians, mollusks and crustaceans. A review. Int J Zoonoses 1984; 11:95-104. &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000092&pid=S0122-0268201100020001500011&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>12. Sanyal D, Douglas T and Roberts R. <i>Salmonella</i> infection acquired from reptilian pets. Arch Dis Child 1997; 77:345-346.  &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000093&pid=S0122-0268201100020001500012&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>13. Ward L. <i>Salmonella</i> perfils pet reptiles. Commun Dis Public Health 2000; 3(1):2-3.  &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000094&pid=S0122-0268201100020001500013&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>14. Rodr&iacute;guez M y Ram&iacute;rez J. <i>Crocodylus intermedius</i> (Caim&aacute;n llanero) ex situ en la Estaci&oacute;n de Biolog&iacute;a Tropical Roberto Franco (EBTRF), Colombia. En: Velasco A, Colomine G, Villarroel G y Quero M (Eds). Memorias del taller para la conservaci&oacute;n del caim&aacute;n del Orinoco (<i>Crocodylus intermedius</i>) en Colombia y Venezuela. Colombia. 2000: 78-132. &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000095&pid=S0122-0268201100020001500014&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>15. Mitchell MA and Shane SM. Preliminary findings of <i>Salmonella</i> spp., in captive green iguanas (<i>Iguana iguana</i>) and their environment. Prev Vet Med 2000; 45:297-304.&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000096&pid=S0122-0268201100020001500015&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>16. Shane SM, Gilbert R and Harrington KS. <i>Salmonella</i> colonization in comercial pet turtles (<i>Pseudemus scripta elegans</i>). Epidemiol Infect 1990; 105:307-316. &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000097&pid=S0122-0268201100020001500016&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>17. Luna G. Manual Operativo de An&aacute;lisis Microbiol&oacute;gicos Para Alimentos. Primera Edici&oacute;n. Bogot&aacute;, D.C., Colombia: Fundaci&oacute;n Universidad de Bogot&aacute; Jorge Tadeo Lozano; 1991. &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000098&pid=S0122-0268201100020001500017&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>18. Corrente M, Madio A, Friendrich KG, Greco G, Desario C, Taglisbue S, D&#39;Incau M, Campolo M and Buonavoglia C. Isolation of <i>Salmonella</i> strains from reptile faeces and comparison of different culture media. J Appl Microbiol 2004; 96:709-715. &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000099&pid=S0122-0268201100020001500018&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>19. Stanchi O. Microbiolog&iacute;a Veterinaria. Primera Edici&oacute;n. Buenos Aires, Argentina. Editorial Intermedica. 2007. &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000100&pid=S0122-0268201100020001500019&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>20. Bonnie E. Isolation and identification of <i>Salmonella</i> from meat, poultry and egg products. In: Microbiology laboratory guidebook. 3rd ed. Food Safety and Inspection Service. Washington D.C.: Department of Agriculture; 2001. &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000101&pid=S0122-0268201100020001500020&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>21. BBL CrystalTM Identification Systems Enteric/Nonfermenter ID Kit. URL Disponible En: <a href="http://www.bd.com/ds/productCenter/245000.asp" target="_blank">http://www.bd.com/ds/productCenter/245000.asp</a>.&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000102&pid=S0122-0268201100020001500021&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>22. Grimont P and Weill F X. Antigenic Formulas of the <i>Salmonella</i> Serovars. 9th revisi&oacute;n. World Health Organization. Collaborating center for reference and research on <i>Salmonella</i>. Paris, France: Institut Pasteur; 2007.   &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000103&pid=S0122-0268201100020001500022&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>23. Pasmans F, Martel A, Boyen F, Vanderkerchove D and Wybo I. Characterization of <i>Salmonella</i> isolates from captive lizards. Vet Microbiol  2005; 110:285-291. &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000104&pid=S0122-0268201100020001500023&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>24. Hidalgo J, D&iacute;az C, P&eacute;rez N, De Frutos C and Herrero A. <i>Salmonella</i> in free living exotic and native turtles and in pet exotic turtles from SW Spain. Vet Sci 2008; 85:449-452. &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000105&pid=S0122-0268201100020001500024&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>25. Bradley T, Angulo F and Mitchell M. Public health education on <i>Salmonella</i> spp. and reptiles. JAVMA 2001; 219:754-755. &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000106&pid=S0122-0268201100020001500025&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>26. Mitchell MA and Shane SM. <i>Salmonella</i> in reptiles. Seminars in avian and exotic pet medicine. Florida: Krieger Publishing Company; 2001. &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000107&pid=S0122-0268201100020001500026&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>27. Frye F L. Infectious diseases. Fungal actinomycete, bacterial, rickettsial and viral diseases. Biomedical and Surgical Aspects of Captive Reptile husbandry. Edwardsville, Krieger: Publishing Company; 1991. &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000108&pid=S0122-0268201100020001500027&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>28. Ba&uuml;mler AJ, Tsolis RM, Fitch TA and Adams LG. Evolution of host adaptation in <i>Salmonella</i> enteric. Infect Immun 1998; 66: 4579-4587. &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000109&pid=S0122-0268201100020001500028&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>29. Sch&ouml;ter M, Roggentin P, Hofmann J, Speicher A, Laufs R and Mack D. Pet snakes as a reservoir for <i>Salmonella</i> enteric subsp. Diarizonae (serogroup IIIb): a prospective study. Appl Environ Microbiol 2004; 70(1):613-315. &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000110&pid=S0122-0268201100020001500029&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>30. Warwick C, Lambiris A, Westwood D and Steedman C. Reptile related salmonellosis. J R Soc Med 2001; 94:124-126. &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000111&pid=S0122-0268201100020001500030&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>31. Mermin J, Hutwagner L, Vugia D, Shallow S, Daily P, Bender J, Koehler J, Marcus R and Angulo F J. Reptiles, Amphibians, and human <i>Salmonella</i> infections: a population based, case-control study. Clin Infect Dis 2004; 38:253-261. &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000112&pid=S0122-0268201100020001500031&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>32. Pasmans F, De Herdt P, Dewulf J and Haesebrouk F. Pathogenesis of infection with <i>Salmonella</i> <i>enteric</i> subsp. enterica serovar Muenchen in the turtle Trachemys scripta scripta. Vet Microbiol 2002; 87:315-325. &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000113&pid=S0122-0268201100020001500032&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>33. Kourany M and Telford S. <i>Salmonella</i> and Arizona infections of alimentary and reproductivetracts of panamanian lizards. Infec Immun 1982; 36:432-434.  &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000114&pid=S0122-0268201100020001500033&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>34. Simmons A. A multiresistant <i>Salmonella</i> enteric serovar Newport. Veterinary Record 2002; 1:150-159. &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000115&pid=S0122-0268201100020001500034&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>34. Ge&uuml;e L and L&ouml;schner U. <i>Salmonella</i> ent&eacute;rica in reptiles of German and Austrian Origin. Vet Microbiol 2002; 84:79-91. &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000116&pid=S0122-0268201100020001500035&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>36. Hidalgo J, D&iacute;az C and Jimenez C. <i>Salmonella</i> in free living terrestrial and aquatic turtles. Vet Microbiol 2007; 119:311-315. &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000117&pid=S0122-0268201100020001500036&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>37. Siebeling R, Neal P and Granberry D. Treatment of <i>Salmonella</i> - Arizona infected turtle eggs with terramycin and chloromycetin by the temperature differential egg dip method. Appl Microbiol 1975; 30(5):791-79. &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000118&pid=S0122-0268201100020001500037&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>38. Kaufman G.E. Pharmacology, pharmacodynamics and drug dosing. In: Ackerman, C (ed), The Biology Husbandry and Health Care of Reptiles. TFH, New Jersey: 1998. &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000119&pid=S0122-0268201100020001500038&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --><!-- ref --><p>39. Jacobson E R. Use of antimicrobial drugs in reptiles. J Zoo Wildl Med 1999; 4:190-199. &nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;&nbsp;[&#160;<a href="javascript:void(0);" onclick="javascript: window.open('/scielo.php?script=sci_nlinks&ref=000120&pid=S0122-0268201100020001500039&lng=','','width=640,height=500,resizable=yes,scrollbars=1,menubar=yes,');">Links</a>&#160;]<!-- end-ref --> ]]></body><back>
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