Una vez que el agua traspasa el hueso cortical, se tiene una permeabilidad mayor al incremento de porosidad, lo que permite que mayor cantidad de agua llene los espacios libres de minerales. Lo anterior se observa por el incremento súbito de la intensidad de la amplitud a aproximadamente 1500 s. Posteriormente, se observan variaciones pequeñas de esta amplitud, cuando la muestra interactúa con el agua, lo cual se atribuye a ésta comienza a interactuar ahora con el hueso trabecular que está en contacto con el láser pero sin afectar notoriamente las estructura de la muestra y, por tanto, las propiedades térmicas del material. En la tercera etapa después de 3000s se observa que la amplitud tiende a decrecer de manera paulatina. Dicho comportamiento se debe a que el agua ha sido retirada de la muestra de la parte del hueso cortical, sin embargo internamente en el hueso trabecular todavía mantiene el agua que permearon las diferentes estructuras de la muestra. El calentamiento modulado continúa y propicia que parte del agua en el interior del hueso se separe de la muestra, modificando de esta manera la estructura y por tanto la señal de amplitud, así como las propiedades térmicas.
El ajuste de las propiedades térmicas presenta tres aspectos principales que son: variaciones en la estructura, espesor y curvatura de la muestra. La señal de referencia no presenta ningún cambio que se pudiese atribuir a ruido, por lo cual se juzga que la medición es realizada de forma adecuada y se puede concluir que los cambios son debidos al proceso dinámico en evaluación.
Así, dado que la rata no sufre ningún tipo de enfermedad que pudiera provocar variaciones estructurales óseas, se considera que el único cambio posible se da en la distribución del tejido óseo, con una estructura densa y porosa en el interior de la muestra.
En la figura 7b se presenta el comportamiento de la fase con respecto al tiempo para el hueso sano. Se observa que el agua, en el inicio de la segunda etapa, promueve un desfasamiento en la referencia pero en la muestra la variación es casi imperceptible. El desfasamiento de la señal que se presenta a aproximadamente 1400 s, es de alrededor de 85º, lo cual se relaciona con el cambio de estructuras que permiten liberación de energía, lo que propicia que el aire en la celda varíe su presión en forma diferente a las ondas previas. La difusión de agua desionizada hacia el interior de la muestra reduce el desfasamiento debido a que el agua es un material que llena poco a poco los espacios en el hueso, pero como la porosidad no es muy elevada en el hueso sano, la cantidad de agua que puede difundirse es relativamente pequeña. El retiro de agua de la muestra promueve una variación de la fase, debido a la pérdida de agua y liberación de los espacios huecos en ésta. El uso de la referencia permitió identificar los tiempos de aplicación y remoción de agua sobre la muestra.
La figura 8a muestra la amplitud versus tiempo para una muestra descalcificada. Se observa que la respuesta de interacción del agua con la muestra es inmediata, por lo cual se tiene una rápida modificación de la estructura ya que el agua llena rápidamente los espacios vacíos. Durante la interacción del agua con la muestra se observan pequeños cambios en amplitud pero se mantiene una línea base estable. Este comportamiento sugiere que aun existen pequeñas cantidades de agua dentro del material, la que debido a los microcalentamientos proporcionados por el láser, fuerza la salida de la misma modificando continuamente la respuesta de la estructura del hueso. Para este caso, en el inicio de la etapa 3, cuando se retira súbitamente el agua, se observa un incremento de la amplitud, en este punto ya no se tiene un movimiento continuo de entrada de agua. El agua modifica la estructura del material debido a que al ser retenida en el hueso y unirse a éste, lo hidrata y, por tanto se modifica también su difusividad térmica; este tipo de interacción agua-hueso origina que se requiera una mayor cantidad de energía calorífica para la remoción del agua, en comparación con el caso del hueso sano. Los datos de la referencia al mantenerse, nos permiten concluir que, como en el caso anterior la medición refleja los cambios del proceso dinámico en estudio.
La figura 8b muestra que la interacción de agua con el hueso modifica la estructura y desfasa la onda de sonido. En el periodo de contacto de agua con la muestra varía la amplitud pero se mantiene una línea base, por lo cual se considera que el desfasamiento neto es mínimo. El retiro súbito de agua se detecta por el cambio súbito de fase, pero ahora en el secado no se genera una curva característica de eliminación de agua al mantener prácticamente constante la fase. Debido a esto se puede inducir que la estructura cambia de manera gradual y de una forma casi imperceptible para la fase.
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